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Cell을 OD측정한 값으로 사용할 부피 정하는 거...

레벨1 ㅎㅇㄷ (대학생)

등록일 2017.06.28 18:32:01
조회6392

안녕하세요 많이 부족한 학부생입니다..제가 E.Coli를 flask-culture후에 OD를 재는데요. 여기서 OD60으로 Total 40ml를 사용해야한다면
[ total V (ml) : 사용해야할 Cell V (ml) = 60 : OD측정된값 ]
이렇게 해서 flask에서 사용해야할 부피 뽑아서 쓰고있는데요..왜 이렇게 하는지 모르는채로 하고 있어서요...설명을 들었었는데 이해도 안되고..도와주세요..ㅠ
Q1. OD60이라는게 무슨 뜻인가요?
Q2. 왜 저렇게 계산을 하는건가요?
Q3. 사용해야할 cell V를 센트리를 돌려서 D.W를
넣고 total V을 맞춰주는데 센트리 돌렸던 부피는 생각 안하는건가요..?

#Cell 계산
#OD측정
#OD

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답변 2

답변등록

레벨6 유용규
2017.06.28 19:42

OD(Optical Density) 각 빛 파장에 대한 광학밀도를 나타내는 거고요... 단위는 없습니다.

OD₆₀₀ 이라는 것은 600nm 파장에서 OD를 측정했다는 거고요.... 대장균의 경우와 같이 아이보리 색을 나타내는 균들은 보통 그부근의 파장을 사용합니다. 혹자들은 감도가 더 좋은 파장을 선택하여 그 파장을 사용하기도 하는데.. 그래서 가끔 논문들에 보면 OD₅₉₅ OD₆₁₀ 등과 같은 수치가 나오기도 합니다.

비례식을 사용하신것 같은데.... [전체부피 : 측정용부피 = OD₆₀₀ 측정값 : OD₆₀₀ 측정값] 이런식으로 표현하신건가요? 아니면 다른 의미이신건가요? 전체 부피 중에서 일부를 취해서 흡광도를 측정하시는 것 맞나요?

그리고 사용해야할 cell V 이건 흡광측정용으로 사용할 부피인데... 이걸 원심분리해서 다시 전체 부피로 증류수를 이용해서 맞춘다면 흡광도값은 낮아질것 같은데요.... 정확하게 어떤 목적으로 흡광도를 측정하시는지 알려주셨으면 합니다.

아니면.... O.D를 측정해서 측정 수치를 이용해서 다른 배지에 접종해야할 양을 유추하시는건 아닌가요? 그래서 그 흡광도 값을 가지고 몇배로 희석해야할 지를 판단해서 멸균증류수로 희석하신거 아닌가요?

레벨1 ㅎㅇㄷ (대학생)
2017.06.29 19:01

아 사용할 cell V라는거는 Alginate와 섞어서 비즈를 만들 cell의 양을 말했던거구요..제가 실험실에서 진행할때 이렇게 계산하는 이유가 흡광도로 cell의 농도를 측정해서 넣어줄 양을 정하는거라고 이해했었거든요..틀린건가요..?

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