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spreading 질문

레벨1 sae ()

등록일 2013.11.29 18:43:50
조회4269

e.coli 배양하고 있는 학부생인데요
LB plate에 spreading시 자꾸 콜로니라기보다는 점에 가까울 정도의 크기로 plate를 다 덮게 자라는데 이는 spreading이 잘못된거라고 교수님이 말씀하시네요..
자꾸자꾸해도 이러는데 이런현상이 왜일어나는거죠
spreading시에 제가 너무세게하나싶어 힘빼고도 해봤고 유리spreader, 플라스틱spreader 바꿔가면서 해봐도 자꾸 자라질않네요ㅠㅠ

spreading시 요령같은거 아시는분 있으면 알려주시면 안될까요ㅠㅠ..

#e.coli
#spreading

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답변 2

답변등록

레벨5 G.P.Ts
2013.11.29 20:09

어떤 방법으로 얻은 대장균인지요?
stock에서 spreading하신 것인지요?

콜로니 수가 너무 많다면, stock 자체를 희석해서 소량 사용하시고,
콜로니 크기가 너무 작다면, 배양 시간을 늘려 보시길 권합니다.

좋은 결과 있길 바랍니다~

레벨6 Kozmoj
2013.11.30 04:49

"점에 가까울 정도의 크기로 plate를 다 덮게" -> cell 이 너무 많을 때 이렇게 됩니다.
E. coli 를 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000 정도 희석해서 spreading 해 보세요.
1/1000 이나 1/10000 정도의 희석 배율에서 원하는 크기/갯수의 콜로니를 볼 수 있을 것 같네요.

말씀하신 spreading 시 "세게/힘빼고" 는 배지가 찢어 지냐 아니냐를 결정하는 요소이지, 콜로니의 크기나 갯수에 영향을 주지 않습니다.
간혹 spreader 의 종류 (재질 또는 회사) 에 따라 나오는 콜로니의 갯수가 차이가 나기도 합니다.
하지만, 학부생이 실험할 때 고려해야 할 만큼 차이가 나지는 않을거라 판단됩니다.

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