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해외에서 받은 vector 녹이는 법 좀 알려주세요.

vector (비회원)

등록일 2013.07.08 15:55:20
조회3041

해외에서 plasmid vector를 받았습니다. membrane 종이에 drop해서 보내줬는데요.

동그랗게 표시된 부분을 autoclave 돌린 가위로 잘게 잘라서 (표시된 부분 안쪽으로)
autoclave 된 ep tube에 넣고, DEPC-WATER 100ul을 넣고 30분 동안 RT에서 녹였습니다.

그런데 나노 드랍으로 확인해보니 purity도 낮고 농도도 엄청 낮게 나왔습니다.

그래서 다시 T.E. buffer 100ul을 넣고 RT에서 30분 동안 incubation 한 다음,
나노 드랍으로 확인해보니 purity는 조금 나았지만 농도는 역시 엄청 낮게 나왔습니다.
(2ng/nl 정도)

원래 이정도밖에 안나오는 건가요?
그냥 이걸 10ul정도 따서 transformation하면 되는 건지요?

고수님들의 조언을 기다립니다.

#vector

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답변 3

답변등록

나부랭 (비회원)
2013.07.08 16:17

네. transformation해서 쓰시면 됩니다.

레벨1 앎세포
2013.07.08 16:30

엄청 낮게나오는거 정상이에요
transformation해서 쓰세요ㅎㅎ

레벨8 엘피스
2013.07.09 09:38

Plasmid DNA를 그냥 사용할 것이 아니라면 농도가 낮은 것은 전혀 문제되지 않습니다. 한두 copy의 plasmid만 있어도 대장균에 넣으면 하루만에 수 mg을 얻을 수도 있습니다.
정량할 필요까지는 없었습니다.

좀 다른 얘기지만,
DNA나 E.coli를 부탁하여 보내주는 경우가 간혹 있는데, 한동안 시간이 지나서 다시 똑 같은 것을 다시 달라고 하기도 합니다. 불려 쓸 생각을 하지 않고 보내준 것을 그냥 썼다는 얘기인데, 나중에 얘기를 들어보면 귀찮아서 그랬다나....

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