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attachment cell seeding 질문이요

레벨1 왕초보 ()

등록일 2009.08.24 01:10:38
조회7721

hela cell처럼 attachment cell은 96well에서

어느 정도로 seeding을 해야 하는지 알고 싶습니다.

논문에서 보면 3000이나 5000개를 well당 96well에서 seeding 하고 24시간 attachment를 하던데

기준이 뭔가여?

confluent가 얼마 정도 되게 seeding을 하는건지....

아니면 다른 기준이 있는건지

저 같은 경우 hela를 96well에 3000개 seeding하고 24시간 attachment하고 보면

well에 꽉 차던데 올바르게 seedig을 한건지요...

아주 기초적인 지식같은데 아직 초보라 잘 모르겠네요...

#seeding
#96well
#hela

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답변 1

답변등록

레벨5 신두식
2009.08.24 15:29

통상적으로 cell attachment는 2가지 방법으로 관찰 합니다
첫번째는 SEM이고요 2번째는 CLSM(Confocal Laser Scanning Microscopy )
입니다.

첫번째 방법은 흑백으로 관찰 돼지만 전자 현미경이다 보니 배율이 만배 이상도 가능하고요

두번째 방법은 광학 이지만 핵과 세포질을 염색 해서 보니 컬러로 세포가 염색 돼
형태학적 관찰을 보기에 용이 합니다.

통상적으로 짧은 시간내에 3시간-1일 기준으로 attach
를 5x10^4/ml로 seeding 하고요

1일 이상으로 관찰 할때는 3x10^4/ml로 seeding 합니다.

96-well일 경우는 200 마이크로 리터가 적정한 기준양이므로
cell수는 나누기 5를 하면 돼겠네요

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