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cell stock 시 FBS와 DMSO의 비율.. ㅠㅠ

cell stock 초보 (비회원)

등록일 2009.03.03 10:45:14
조회21928

지금 일반적인 FBS와 DMSO의 비율 10:1 정도 1ml : 100ul 을 넣어서 -20, -70으로 
옮겨서 저장 하고 있는데요 이건 문제가 안되고 잘됩니다. 

근데 이번에 deep freezer를 버리고? -40을 가지고 할건데 
전혀 문제가 안될련지요.. ㅠㅠ 

또 FBS:DMSO의 비율을 역으로 할려고 하는데요 1:9 또는 2:8 정도로...  
DMSO의 비율 때문에 cell이 damage 입고 죽어 나갈꺼 같은데 
성공 시킬 방법이 없을까요? 

무조건 성공 시켜라고 하는데..  좀 답답 하네요 

주위에 물어봐도 다들 글쎄 안될텐데라 하니...;;   

일부러 안되는거 시키는거라고 그런 답변은 사양할게요ㅠㅠ 
된다고 보고 될려는 쪽에 방법을 좀 부탁 드려요

#cell stock

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답변 3

답변등록

레벨5 윤형문
2009.03.03 12:52

-40도로 바로 스탁을 얼릴 때 셀 상태가 좋았다면 다시 풀었을 때 

50% 이상은 살아 있을 거 같네요

예전에 스탁을 만들어 -20도에 둔 걸 깜빡하고 일주일 넘도록 두었던 스탁을

후에 버리기 아까워서 풀어 봤었는데 50% 정도는 살아 있더라구요..


그리고 DMSO 비율을 역으로 사용한다면 90% DMSO를 넣은 다는 말씀인데

혹시 DMSO 사용하다가 손에 흘린적이 있으신가요??

손이 이상해지는 것을 느낄 겁니다. 오랜 기억이라 아마 몇초 아님 몇분 사이로..

높은 농도의 DMSO는 세포막의 투과성을 증가시켜 세포를 터지도록 해 버립니다. 

따라서 이 방법은 정말 아닌거 같네요


FBS를 아낄려고 그러시는 거라면 DMSO:FBS:DMEM = 1:2:7으로 스탁을 만드는 것은

어떠신지요?

지영 (비회원)
2009.03.03 13:40

-40도씨로 옮긴 후에 중간에 녹거나 하지 않고 다음날 LN2로 바로 옮긴다면

셀이 몽땅 죽거나 하지는 않을 거에요.

그리고 제가 stock 만드는 방법은 media에 FBS 50% + DMSO 5% 입니다.

예를 들면, media 500 ul + FBS 500 ul + DMSO 50 ul

cell stock 초보 (비회원)
2009.03.03 19:23

일단 샘플 자체에 배지는 최대한 넣지 않으려고 하고 있어서요.. 

그러다 보니 배지를 넣으면 그나마 DMSO의 양이 좀 늘어도 

어느정도 커버를 할 수 있을듯 싶은데.. 그게 안되다 보니깐요 ㅠㅠ 

DMSO의 양을 늘리는건..  cell에 damage가 너무 크겠죠? 

다른 무슨 방법 없을까요?  어디선 그렇게 했다던가 

논문이 있다거나요 ㅠㅠ

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