한가지세포에2-3가지 retrovirus infection시키려면, 2-3종류의 selection marker를 사용해야되는지요?예를 들면, 두가지 plasmid를 동일한 retrovirus vector(pBABE)에 cloning한후, puromycin가지고 selection을 진행하면 않되는지요? 반드시 G418와 같은 다른 marker로 selection를 해야하는지, 아시는분들 답복주시면 감사하겠습니다.
두가지를 같은 marker로 써서 분리했을때 어떤 것은 둘다 가지고 있을 수도 있지만 하나씩만 가지고 있는 것이 더 많을 것 같습니다. 확실히 하려면 두개를 다 selection하는 방법을 선택해야 하지 않을까요?
한예를 들면 예전에 저는 두 단백질의 co-localization을 보기 위해 tagging만 다른 동일 vector로 두개의 유전자를 co-transfection한 적이 있습니다. 이를 immunofluorescence로 봤을때 두개가 같이 보이는 것의 비율은 아주 낮았습니다. 물론 retrovector야 infection의 개념이라 좀 다를 수도 있겠지만.......
