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sds-page gel

레벨1 초보 ()

등록일 2007.10.30 16:47:02
조회5534

질문이 두개인데요....

1.  sds-page gel을 resolving-15%, stacking-5% 로 항상 써 왔습니다.
    이번에 7.5%로 내릴려고 하는데 비율 계산을 못해서..ㅡ.ㅜ

15%를 쓸 때 
d.w                    7.1ml
40% acrylamide         7.5ml
1.5M Tris-cl(ph 8.8)     5ml
10% sds                0.2ml
10% aps                0.2ml
TEMED                    8㎕
이렇게 쓰고 있습니다.

7.5%로 사용할려고 하는데 어떻게 해야하는지 몰라서요 ㅡ.ㅜ

답변 부탁드립니다~~~~



2. non-denaturing gel을 내려야 하는데 
   위에처럼 20ml을 만들면 다 똑같이 넣고 sds만 빼고 나머지는 d.w로 채우면 되나요?
그리고 sample을 준비 할 때 sample buffer(2* sample buffer + DTT)쓸 때 DTT을 빼고 boiling 하지 않고 loading 하는 게 맞는지요..
첨 해보는지라 이것저것 알아봤는데 확실한지 잘 모르겠어서 여쭤봅니다~

답변부탁드립니다~~

#sds-page gel

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답변 2

답변등록

레벨8 안재진
2007.10.31 01:05

15%를 쓸 때 조성이 아래와 같다면...

d.w 7.1ml 
40% acrylamide 7.5ml 
1.5M Tris-cl(ph 8.8) 5ml 
10% sds 0.2ml 
10% aps 0.2ml 
TEMED 8㎕ 
이렇게 쓰고 있습니다. 

7.5% gel 조성은 Acrylamide 만 반으로 줄이면 됩니다. 그리고 나머지는 DW로 채우면 되고요... 때문에

d.w 10.35ml 
40% acrylamide 3.25ml 
1.5M Tris-cl(ph 8.8) 5ml 
10% sds 0.2ml 
10% aps 0.2ml 
TEMED 8㎕ 
이렇게 쓰고 있습니다. 

non-denaturing gel은 detergent 요소를 빼고 그부분을 물로 채워서 내리면 됩니다.

초보 (비회원)
2007.10.31 09:42

좋은 답변  감사합니다~~^^

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