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western blot시 antibody

western blot (비회원)

등록일 2007.04.03 21:16:37
조회6163

western blot을 하고 있는데요; 

1st antibody를 실험실에서 정제한 proetin을 mouse에 immunization하여 만들었는데요. 

이때 proetein은 his tag이 붙어 있는 상태로 정제가 되잖아요; 

그런데 detection하고자 하는 protein은 his tag이 없는 상태이구요.; 

물론 polyclonal antibody가 만들어 지니깐... detection은 될꺼 같긴한데요..; 

이렇게 해도 western blot하기엔 괜찮은 건가요?

아님 his tag을 떼고 antibody를 만들어야 하나요??

#western blot

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답변 2

답변등록

레벨4 지밀
2007.04.03 21:37

만들어진 항체가 his는 못잡고 target만 잡는다면 문제가 없을 듯 하구요.

만약을 his를 잡고 그것이 문제가 된다면, his affinity column 또는 his를 떼낸 antigen affinity column을 만들어서 항체를 정제하면 될 것 같습니다.

western blot (비회원)
2007.04.05 11:12

감사합니다!!! ^-^

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