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his-tag column으로 정제한 단백질 imidazol 제거에 관하여

레벨1 초보자입니다 ()

등록일 2006.06.27 22:51:52
조회3541

his-tag column으로 정제한 단백질을 imidazol을 제거하기(농축) 위하여 centricon(centrifugal filter devices)을 이용했는데(시간이 좀 걸려요.하루정도) 최종 획득한 단백질 농도가 너무 낮아요.단백질 농도를 높이는 좋은 방법 좀 부탁드립니다.

#his-tag column
#imidazol

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답변 1

답변등록

엘피스 (비회원)
2006.06.28 13:51

처음 정제한 단백질은 많았는데 최종 얻은 단백질의 양이 많이 적어졌다는 말씀이신지요? Centricon은 mol cut방식이기는 하지만 단백질이 크더라도 구조에 따라 membrane을 통과하기도 하여 centricon만으로 buffer change와 농축을 동시에 해주시면 yield가 많이 떨어질 수도 있습니다.

Dialysis를 해주시고 최종 농축은 아주 짧은 시간만 해주세요.
그리고 mol cut size가 단백질에 적합한 것인지 사전에 반드시 확인을 해주셔야 합니다.

특성을 잘 모르는 단백질의 경우에 한두번씩 저도 많이 날려먹었습니다.

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