SH-SY5Y cell 배양 관련해서 질문 있습니다 | 실험 Q&A > 커뮤니티

Q SH-SY5Y cell 배양 관련해서 질문 있습니다

레벨01 dalong (대학원생)

안녕하세요. SH-SY5Y cell culture 관련하여 경험 있으신 분들께 질문드립니다.

최근 SH-SY5Y cell을 처음 thawing하여 배양하고 있는데, thawing 후 약 24시간이 지났음에도 불구하고 cell이 flask 바닥에 충분히 부착되지 않고 떠 있는 cell이 상당히 많은 상태입니다.

일부 cell은 부착되어 있는 것처럼 보이지만 전체적으로 부착률이 낮고, 일반적으로 보는 SH-SY5Y morphology가 아직 뚜렷하게 나타나지 않는 상황입니다.

SH-SY5Y의 경우 thawing 직후에는 원래 부착이 다소 느리거나, recovery 과정에서 많은 cell이 떠 있는 경우가 있는지 궁금합니다.

또한 SH-SY5Y를 처음 배양할 때 아래와 같은 부분에서 특별히 주의해야 할 점이 있을까요?

현재는 thawing 후 약 하루가 지난 상태라 조금 더 기다려봐야 할지, 아니면 부착되지 않은 cell이 많다면 다른 조치를 취해야 할지도 고민하고 있습니다.

SH-SY5Y를 많이 배양해보신 분들의 경험이나 팁을 알려주시면 감사하겠습니다.

Cell Biology > Cell Culture

A 답변 3

안녕하세요.

마침 제가 배양을 많이 했던 cell 이네요. sh-sy5y cell 은 기존 다른 cell line 처럼 특별히

잘 자라지 않거나 성장속도에 문제가 있던 cell 은 아닙니다.

경우에 따라 media 상태 즉, 너무 오래되었거나, 필수 아미노산이 파괴되었거나 인큐베이터 온도나 co2 %가

잘 맞지 않는지 확인이 필요할거 같아요. atcc 에서 바로 받아서 배양했을때에도 크게 문제가 없었던것으로

기억나니까 조금 기다려본후 그리고 여러 다른 조건들을 체크한후에 배양하는것을 추천드립니다.

사진이 있으면 좀더 자세히 피드백해드릴거 같은데 다음기회에,,,

SH-SY5Y는 자라는 것은 느리지만 일반적인 DMEM에서 잘 자라는 cell입니다.

잘 떨어지지도 않고요.

Mycoplasma contamination이 된 것은 아닌가 의심되네요.

Plasmocure와 같은 mycoplasma 제거 시약을 써보거나 새로 분양받으시는게 좋을 것 같습니다.

SH-SY5Y cell line 의 경우 부착세포와 부유세포 둘다 존재하는 세포입니다.

다만, 부착이 적은 세포라면 세포 관리에 문제가 있었던 것 같습니다.

초기 p cell 을 확인하는 것이 좋을 것 같습니다.

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