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Q Protease assay 데이터 일관성 문제
레벨01 다중 (대학원생)
- 26.07.07 14:38
- 조회241
안녕하십니까, 석사 1학기차 학생입니다.
제가 지금 하고 있는 프로젝트 중에 Protease assay를 통해서 효소 활성 분석 실험을 하고 있는데요.
균주(E.coli 아님)를 배양하고 OD를 쟀을 때, 1.0이 넘으면 0.05로 맞춘 다음에 24h 배양합니다(균주끼리 상대적 비교를 하기 위해서).
상층액을 추출해서 원액, 희석액(1/2x... 직렬희석) 이런 식으로 샘플을 만든 다음에, Protease assay kit를 통해서 형광값을 측정하고 있습니다.
여기서 문제는, 형광 측정할 때마다 값이랑 그래프(1시간 동안 연속 측정)가 다르게 나옵니다.
5월 14일 (1x, 1/2x, 1/4x, 1/8x, 1/16x, 1/32x)| 16658 |
| 22987 |
| 29107 |
| 34425 |
| 39050 |
| 44077 |
| 48578 |
첫 번째 그래프(1x) 값만 가져왔습니다.
6월 11일 (1x, 1/2x, 1/4x, 1/8x, 1/16x, 1/32x)| 22610 |
| 42626 |
| 57861 |
| 71564 |
| 83064 |
| 91468 |
| OVRFLW |
첫 번째 그래프(1x) 값만 가져왔습니다.
어떤 날에는 효소 활성이 별로 없거나, 어떤 날에는 효소 활성이 갑자기 잘 되거나 이렇게 들쑥날쑥합니다.
미생물은 배양할 때마다 다르게 자라서 효소 활성도 다르게 나온다 하더라고요.
이에 데이터 일관성 유지법 여쭤보니, 그냥 한꺼번에 대량배양해서 실험할 때마다 그 배양액으로 실험한다고 하던데,
이렇게 하면 일관성이 있게 나오겠지만, 제가 보기엔 뭔가 데이터 조작하는 것 같은 느낌이 들어서 좀 그렇습니다.
대량 배양해서 실험할 때마다 쓰는 게 나을지, 아니면 지금 하는 실험처럼 그냥 할 때마다 새로 배양해서 실험하는 게 나을지, 아니면 다른 조언이 있는지 여쭤보고 싶습니다.
긴 글 읽어주셔서 감사합니다.
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