세대가 지나면서 1번 또는 9번 염색체에 붙을 수 있어 발현량 차이가 불분명해 질 수 있다는 뜻인가요? 무작위 삽입은 TG 라인이 처음 만들어질 때 벡터가 어느 염색체, 어느 위치에, 몇 copy로 들어갈지가 정해지는데, 한 번 그렇게 삽입된 후에는 그 패턴이 그 라인에서 고정되어 자손에게 유전됩니다. 세대가 지나면서 발현량 차이는 copy 수, 즉 Homo냐 Hetero냐에 의해서만 달라집니다. 서로 다른 founder lines 섞지 말고, 같은 TG 라인에서만 개체들을 비교해 보세요.
F1, F2에서는 TG positive 개체와 WT를 교배해서 라인을 정리하고, F3에서는 같은 F2 부모에서 나온 동배 TG positive끼리 교배한 뒤, F4에서 qPCR/ddPCR 로 TG+ or WT 및 hetero/homo를 확인해 보세요.
