실험 Q&A는 연구 활동 중 생겨난 궁금증을 지식 나눔을 통해 해소하고 함께 성장하는 공간입니다.
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Q
안녕하세요. lysozyme unit 계산 방법을 도저히 모르겠어서 글을 올려봅니다... 일단 각 농도의 BSA 흡광도를 측정한 후 (OD 750nm) standard curve를 그렸습니다. standard curve 방정식은 y = 0.1471x + 0.1363입니다. 또한 lysozyme의 OD750nm 값도 측정했는데 1.537이었습니다. 이후 아래의 Lysozyme activity assay protocol로 실험을 진행했습니다. ① RIPA buffer(membrane lysis buffer)에 Micrococcus luteus(Substrate)를 1mg/ml 농도로 준비 ② substrate 시료 980ul에 준비된 lysozyme을 20ul 첨가 (0, 60min) ③ 0min sample tube는 얼음에 넣기 ④ 37도에서 60min 간 반응 ⑤ spectrophotometer로 OD 420nm로 측정 위 protocol로 측정한 lysozyme의 0min에서의 OD420nm 값은 1.380, 60min에서의 OD420nm 값은 0.788 입니다. 제가 작성한 조건을 통해 lysozyme unit을 구할 수 있다고 하는데 어떻게 해야 될 지 정말 모르겠습니다... 알려주시면 감사드리겠습니다
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- 박카스A (대학생)
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2023.12.10
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Q
IPTG에 대해 알고 싶어 질문해보았습니다. IPTG에 의해 GST가 과대발현 된다고 하는데 그러면 IPTG가 없는 대장균 배지에서는 GST가 발현되지 않는 것입니까? Tag promoter가 IPTG와 결합되서 발현되어 GST가 발현된다고 이해를 했는데 잘 몰르겠어 질문남겨봅니다.
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- 나니노 (대학생)
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2023.12.09
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Q
cDNA를 PCR하는데 F+T primer을 넣고 이게 GAPDH의 역할 한다고 적혀있는데 이 프라이머의 정식 명칭이 궁금합니다.
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- meredy386 (대학생)
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2023.12.09
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Q
IMAC 진행 후 SDSPAGE 결과에선 타겟 밴드(진한 밴드) 아래 쪽으로 불순물들이 나오는데, IMAC 결과를 SEC 진행시킨 다음에 SDSPAGE시켰더니 타겟 밴드보다 더 무거운 쪽으로 나오네요; SDSPAGE 환경에선 단백질 결합 죄다 깨지는걸로 아는데.... 불순물들이 뭉친걸까요?
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- 클라리 (대학생)
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2023.12.09
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Q
아래 사진에 첨부한 것이 저희 조에서 PCR 후에 제한효소 처리하고 전기영동을 내린 결과입니다. Blue colony는 3.0 kb에서 확인되었는데 White colony의 결과가 모두 달라서 해석이 어렵더라구요.. white 2는 3.0 : vector, 2.0 : insert 라고 추정했고 위쪽에 하나 밴드가 더 있는 것은 다른 단백질의 오염이거나 open circle이라고 추측해보았습니다. white 3 는 supercoiled 이라고 추정해보았는데 이 해석이 맞는 지 궁금합니다. 그리고 white 1은 어떻게 해석해야 할 지를 모르겠습니다.. 알려주시면 감사하겠습니다!!
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- 잴리 (대학생)
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2023.12.09
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Q
안녕하세요. 세포독성 실험하다가 궁금한 점이 생겨서 질문드립니다. 1. MTT assay에서 positive control에 처리할 drug solution 조제에 사용한 용매가 유기용매라서 독성을 보이는 경우 조제에 사용한 용매를 negative control 에 처리를 해줘야 할까요? 2. Blank로는 약물을 처리하지 않은 negative control well 그리고 세포가 없는 배지+drug 조제에 사용한 용매+MTT+DMSO well 이 맞을까요?
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- 완두빈 (대학생)
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2023.12.09
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Q
안녕하세요. 황색포도상구균을 이용한 실험을 진행중입니다. 황색포도상구균 배양이 37도 정도인것은 알고 있는데 보관에 대해서는 찾아봐도 정확한 정보가 없어서요. 균을 37도에 보관해도 되는 것인지요? 초보 연구자라서 고수님들의 도움이 필요합니다 ㅠㅠ
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- 뭄 (일반인)
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2023.12.09
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Q
TOPO cloning의 개념을 공부하려고 하는데, TOPO cloning을 검색하면 TOPO TA cloning이 나와서요 TOPO cloning = TOPO TA cloning이 같은 개념인가요?
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- 대학생. (대학생)
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2023.12.09
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Q
Immunoblot이 Immuno assay랑 같은 건가요? Immuno assay에는 ELISA랑 Western blot analysis가 대표적인 것으로 알고 있는데 Immunoblot이라고 검색하면 Western blot이 나와서요 Immunoblot = Immuno assay인가요? 아니면 Immunoblot = Western blot 인가요?
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- 대학생. (대학생)
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2023.12.09
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Q
IEF-2DE가 제가 생각하기로는 Isoelectric focusing(IEF)와 two dimensional electrophoresis(2DE)인 것 같습니다만, 2DE 이 자체가 IEF랑 SDS-PAGE를 혼합해놓은 실험기법아닌가요? 저렇게 적는 이유가 무엇인지 알 수 있을까요?
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- 대학생. (대학생)
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- 추천수0
2023.12.09
