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[고려대 혁신단, 무료나눔/배송] 제한효소없이 5분만에 끝내는 혁신적 클로닝 키트 5종 (50-100 rxn, Clonase, KOD Hi-Fi DNA Pol, Clean-up)
- 진스앤그로브랩
- 마감일2025.11.10
- 등록2025.05.10
- 조회25
레몬 5-min 유전자 클로닝 기술을 소개합니다 (2024 과기정통부 선정, 고려대 혁신단)
시제품 사용후기 1 : 서울대학교 한 교수님 실험실 김 박사과정생 님. | "저희 연구실에서 클로닝시 레몬 클로닝 패키지로 사용하였을 때, 성공률도 좋았고 속도도 확실히 빨라서 지속적으로 레몬 클로닝 패키지를 사용하고 싶습니다." |
시제품 사용후기 2 : 서울대학교 구 교수님 실험실 최 박사과정생 님. | "좋은 후기에 맞게 저희 역시 보내주신 레몬 클로닝 패키지 시제품으로 클로닝이 잘되며 유용하게 사용하고 있습니다. 좋은 제품 제작해 주셔서 감사합니다." |
시제품 사용후기 3 : 고려대학교 생명과학과 장 박사님. | "클로닝때 필요한 중요재료들이 한번에 다 들어 있어서 매우 용이. 타사 PCR Purification 키트 (예, Labopass) 와 비교하여 손색없이 Purification 진행 가능. In-Fusion 등 타사 제품과 비교하여 동일한 클로닝 효율을 얻을수 있음. 타사대비 매우 저렴한 비용" |
시제품 사용후기 4: 국립보건원 이 박사님. | "Lemon cloning 시제품 받아 써봤는데, 너무 좋았습니다. 사실 이전에 깁슨/인퓨전 시스템을 이용해 보지 않아 약간 망설였던 부분도 있었는데, 막상 사용해 보니 너무 편하고 좋습니다. 좋은 제품 알게 해 주셔서 감사합니다." |
시제품 사용후기 5: 한국식품연구원 최 선임연구원님. | "레몬 유전자 클로닝 시제품을 사용하면서 큰 만족감을 느끼고 있습니다. 이전에 보내주신 제품을 실험실에서 Takara S***과 비교 테스트해 본 결과, 효율성 면에서 탁월한 성능을 보여주어 저희 연구에 큰 도움이 되고 있습니다." |
시제품 사용후기 6: 제주대학교 의과대학 김 교수님. | "보내주신 무료샘플을 사용해 보았습니다. 두조각 어셈블리라서 어렵지 않은 클로닝이긴 했지만 저희가 국외 제품과 국내 제품, 그리고 보내주신 제품을 동시에 진행해 보았을때 아주 잘 클로닝이 되었습니다.가격적인 면에서 아주 큰 장점이 있어 앞으로 귀사의 레몬클로닝 제품을 사용하고자 합니다. 여러조각 클로닝에도 좋은 효율을 보인다면 매우 큰 경쟁력 있는 제품이 될 것으로 생각합니다. 귀사의 발전을 기원합니다." |
시제품 사용을 원하시면 아래 링크를 클릭하시고 주소 등 관련정보 기입을 부탁드립니다 (무료배송/우체국, 사은품 제공 (아래 부가사항 13 참조)).
안녕하세요? 저희 진스앤그로브랩(Genes and Grove Lab)은 고려대학교 혁신단 소속으로, 혁신적인 유전자 클로닝 기술을 인정받아 2024년 과학기술정보통신부 주관 창업탐색 지원사업에 선정되었습니다.
저희 클로닝 기술의 특징은 제한효소 사용없이 누구나 쉽고 (원스텝), 빠르고 (상온에서 5분 반응), 저렴하게 (제한효소 및 기존 상업적 클로닝 키트 대비 1/10, 2천원/rxn) 본인이 원하는 모든 종류의 유전자 Constructs를 하루만에 만들 수 있습니다 (자세한 사항은 아래 참조해 주세요).
클로닝시 가장 중요한 요소는 고농도, 고품질의 DNA 확보 및 Cloning enzyme의 성능 및 안정성, 고효율의 C. Cell 등이 있습니다.
아래에 저희가 제공하는 5가지 툴은 연구자님들의 클로닝 성공률과 편의성을 획기적으로 높여 드릴것을 약속드립니다.
Positive control DNA (A+B)도 동봉해 드리니 속는셈치시고 단 한번만이라도 시제품 테스트를 부탁드립니다.
아래 5가지 툴이 포함된 유전자 클로닝 키트 시제품을 무료 나눔/배포 (20만원 상당) 하오니 많은 신청을 부탁드립니다.
1. Lemon Cloning 5x Premix (50 rxns) : Fast (5-min at Room Temperature), Easy & Simple (1-Step), Low Cost (1/10). Stable (>3 months at 37C)
2. KOD High-Fidelity DNA Pol 2x Premix (1 mL, 100 rxns, from TOYOBO Bio Company) : Use this high-fidelity polymerase only for the preparation of DNAs (Cloning purpose).
: Fast (1~5 Sec /1 kb). Specific, Long (~15 kb), and Robust PCR products, Very low mutation rate (less than 1 mutation/30 kb 증폭시).
3. PCR clean-up kit (100 rxns) : Fast (10 min), Simple, Highly concentrated DNA (5~10 μL).
4. Transformation Buffer for making 100 ultra-efficient C. Cell tubes.
5. Glass beads (100 rxns) : Easy and fast (5 sec) spreading without contamination.
저희 레몬 클로닝 기술은 기존의 깁슨/인퓨전 클로닝 원리와 호환이 되기에 저희의 창업 여부와 관계없이, 기존의 기술을 지속적으로 사용 가능합니다.
레몬 클로닝 5x Premix를 37°C 고온에 3개월을 보관해도 클로닝 효율이 줄어들지 않을 만큼 안정성이 뛰어나 단백질 효소 변성으로 인한 클로닝 실패 확률이 제로에 가깝습니다.
저희 레몬 5-min 유전자 클로닝 기술은 지난 10년동안 해외 및 국내 여러 연구실의 수많은 연구원들에 의해 이미 성능을 검증을 받았으며 편리성과 속도 및 효율성이 탁월해 기존의 제한효소 및 상업적 클로닝 방법을 사용하시던 분들은 저희 클로닝 기술이 획기적임을 인정해 주셨습니다.
저희는 클로닝 성공률을 최대화하는데 초점을 맞추었습니다. 기존 제한효소 및 상업적 클로닝 방법은 실험조건 (예, DNA quantity/quality/size, 효소반응 온도 및 시간, 한번에 재조합 하려는 DNA 갯수 등)에 따라 클로닝 성공률에서 큰 차이를 보입니다. 저희 레몬 클로닝 방법은 저희가 제공한 5가지 툴을 매뉴얼대로 잘 따라만 하시면 기존의 클로닝 방법 대비 훨씬 더 높은 클로닝 성공률과 빠른 속도 및 편의성을 보장합니다. 저희는 이 기술을 사용하여 지난 10여년 동안 수천개의 다양한 유전자 Constructs (3-18 kb, 1~6 piece-DNA assembly)를 만들어 왔으며 이 가운데 클로닝에 실패한 경험이 거의 없을만큼 100%에 가까운 클로닝 성공률을 보여 왔습니다.
저희는 이 유전자 클로닝 기술이 클로닝에 어려움을 겪거나 많은 시간을 할애하는 연구자 및 학생분 들께 실질적인 도움이 되길 바라고, 특히 연구자분들의 시간적·경제적 부담을 줄이는 데 기여할 수 있기를 바랍니다. 특히 클로닝에 갓 입문한 학생분들에게는 분명 저희 기술이 큰 도움이 될 것이라 생각합니다.
저희 제품을 써보시고 만족하시면 저희 창업 이전까지 그리고 정부로부터 지원 받은 시제품 재료가 고갈될때까지 지속적으로 무료나눔/지원하도록 하겠습니다. 문의사항이 있으시면 언제든지 메일을 보내주세요. 서울권이시면 필요시 저희가 직접 연구실을 방문하여 시제품을 전달하고, 사용법 및 클로닝 노하우 등을 설명해 드리겠습니다.
마지막으로, 이 클로닝 기술이 특히 유용할 것 같은 지인이 계시다면 이 게시글을 추천 부탁드립니다.
읽어주셔서 진심으로 감사드리며, 혹 광고성으로 보였다면 너그러운 양해 부탁드립니다. 다시 한번 감사드립니다.
진스앤그로브랩 올림
고려대 혁신단 소속 (e-mail: vinejung@gmail.com or genesandgrove@gmail.com phone: 010-8489-2703)
레몬 5-min 유전자 클로닝 기술의 원리, 특징, 장점, 및 부가사항들
1. 레몬 유전자 클로닝 기술의 원리 :
말단 서열 (15-18 bp)이 같은 두개 또는 여러개의 DNA를 섞어 유전자 재조합 효소와 상온에서 3-5분간 반응 (원스텝) 시키면 하나의 재조합된 DNA 벡터가 생성됩니다.
2. 레몬 유전자 클로닝 기술의 클로닝 효율 :
레몬 클로닝 효소를 단 5분간 반응 시키고 C. Cell 에 형질전환 한뒤 약 1/6만 스프레딩 했을때 아래와 같은 콜로니 형성률을 얻을수 있습니다 (100%에 가까운 클로닝 성공률 보장).
3. 기존 클로닝 방법과 장단점 비교
4. 레몬 클로닝 기술과 기존 상업적 클로닝 키트와의 효율 비교 : 속도, 간편성, 가격에서 더 뛰어나면서 클로닝 효율은 비슷하거나 더 좋습니다.
A. Comparison between the In-Fusion and Lemon 5-min cloning method. B. Comparison between the Gibson Assembly and Lemon 5-min cloning method. C. Verification of eight E. coli colonies obtained using the Lemon 5-min cloning method by miniprep (100% cloning efficiency).
5. 레몬 클로닝 기술의 응용 및 다양한 활용성
: 레몬 클로닝 키트의 다양한 활용 방법. 1~6-piece DNA assembly, 모든 DNA 부위 insertion/deletion, 및 Site-directed mutagenesis 등 단 한번의 반응으로 모두 쉽게 만들수 있습니다.
6. 레몬 클로닝 기술의 온도 안정성 테스트
레몬 클로닝 효소를 37도씨를 비롯한 다양한 온도에 한달을 보관한 뒤 클로닝 실험을 진행. 아래는 1/6 만 스프레딩 했을때 콜로니 생성율을 보여줍니다.
고온에 오랫동안 클로닝 키트를 보관하여도 클로닝 효율에 영향이 없음을 확인하였습니다. 이는 레몬 클로닝 효소가 고온에서도 아주 안정함을 의미하고 효소 변형으로 인한 클로닝 실패 확률이 제로에 가까움을 의미합니다.
7. DNA 양과 반응시간에 따른 클로닝 효율 테스트
아래는 레몬 클로닝 키트를 사용해 유전자를 클로닝 했을때, 사용된 DNA 의 양과 반응 시간에 따른 클로닝 효율을 보여줍니다. 각기 다른 DNA 양과 레몬 클로닝 효소를 상온에서 3분 또는 5분간 처리하고, C. Cell 형질전환을 한 뒤, 1/6 만 스프레딩 했을때 아래의 결과를 얻을수 있습니다.
: 각각의 DNA 양이 30-100 ng 일때는 상온에서 5분간 반응을 추천하고, DNA의 양이 10-30 ng 일때는 상온에서 3분간의 반응을 추천합니다.
8. 레몬 클로닝의 실제 예시 (DNA A : pENTR2B-AMP + DNA B : AtFLC)
- 시제품에 포함된 Positive Control DNA Mix tube에는 아래 DNA A 와 DNA B 가 섞여 있습니다. Positive Control DNA Mix 4 uL (50 ng each) 와 5x 레몬 클로닝 효소 1 uL를 넣어 상온에서 5분간 반응시킨 뒤, Heat shock후 형질전환하면 위의 그림과 같은 콜로니 생성 효율을 확인하실수 있습니다. 아래 그림에서 두개의 DNA의 말단서열 15bp가 각각 같음을 확인할 수 있습니다. 아래 제시된 OVERLAP SEQ 뿐만이 아니라 DNA의 어느 곳이든 자유롭게 15-18 BP를 OVERLAP SEQ로 사용가능합니다.
9. 레몬 유전자 클로닝 유튜브 홍보 동영상 1 : Lemon DNA Cloning Technology by Genes and Grove Lab (1:30 sec)
10. 레몬 유전자 클로닝 유튜브 홍보 동영상 2 : Lemon DNA Gene Cloning Package, Principle by Genes and Grove Lab (2:45 sec)
12. 제품 설명서 및 자료 구글 드라이브 링크 :
또는 아래 QR 코드 또는 주소창에 bit.ly/3BPtSva
13. 사은품 : 케이블 타이 3 미터
본 정보는 "진스앤그로브랩" (으)로 문의 바랍니다.
