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 전체 > Chemical biology > Extraction/Concentration
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질문 rt-qpcr에서 threshold 선 아래의 피크는 ,,?
알nsm(대학원생)  |  11.08 15:06
첨부파일 파일첨부: RT-PCR 결과.xlsx (41 KB)
안녕하세요? 저는 초보 생물 대학원생입니다..
(사진은 엑셀파일 첨부 하였습니다!)

실험 후 rt-pcr을 사용하여 dna의 증폭을 확인하였는데 사진과 같이 기준선이 되는 threshold선

아래로 피크가 나타났는데 이런경우 증폭이 되었다고 생각해야하는건가요? 아니면 증폭이 되지 않았다고 결론을 지어야 하는 걸까요?
(Ct값은 30 정도 입니다!)


화학전공에서 갑자기 생물 실험을 하게 되 부족한 부분이 많지만 늘 브릭을 통해 많이 배워갑니다ㅜㅜ



#rt-pcr
 
#qpcr
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
멜트커브는 그렇게 보는 게 아니고, 피크가 몇 개있는지 봅니다.


님이 엑셀에 포함한 

1. 상단 그림: 커브 네개 중에 한개는 산이 두 개 있음.
2. 하단 그림: 커브 다섯개 중에 한개는 산이 두개 있음.

산 (피크)이 하나 있어야 되요. 두개 세개 있다는 것은 젤로 피씨할 했을 때 나타나는 난스피시픽 밴드와 같아요.

잘 모르겠으면, 젤도 같이 해봐요. 베이스 페어 크기는 맞게 나타나는지, 밴드는 하나만 선명히 뜨는지.
올챙이Hour  |  11.09 00:07  
그렇다면 threshold선은 무엇인가요..? 피크가 저 선을 넘지 않아도 괜찮은 건가요??
알nsm  |  11.09 09:28  
??;;
저건 melt curve 데이터 아닌가요?
RT를 하기 전에 primer 디자인이 잘 되었는지를 먼저 확인해 보시기 바랍니다.
저 rt조건에서 pcr했을때 single band만 뜨는지 확인하시구요
그다음 qRT를 하셔야 정확한 비교가 가능합니다.

!!  |  11.10 15:57   
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