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질문 LAL assay endotoxin 측정시에..
알LAL  |  2015.09.14 02:43

endotoxin free tips 을 사용하라고 되있는데,

저는 따로 구매해야되는지 모르고, 그냥 121도에서 20분간 Autoclaved 한 팁과 튜브를

사용했는데, 팁까지 다 구매해야되는건가요? 그래서인지 데이터도 샘플이

스탠다드에 들어오지 않게 나와버렸네요..그게 원인일지..

그리고 LAL assay가 endotoxin free 해야된다면은 처리시에 clean bench에서 하는게

맞는건가요? 굳이 그런말이 안되있어서 여쭤봅니다!
#LAL, endotoxin
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
확실하진 않지만 그게 원인이 될수도 있습니다.

아무래도 endotoxin이 열에 대한 내성이 강하다고 알려져있기도 하구요.

저희연구실도 pyrogen free tips 나 endotoxin free tips를 이용하여
 
endotoxin을 측정하고 있거든요

그리고 실험할때는 따로 clean bench에서 하진않고 밖에서 하는데

결과는 잘 나오더군요

그리고 LAL endotoxin 에 쓰이는 시약들은 빛에 민감해서 빛이안드는곳에 보관하시고
각각 보관기간이나 보관온도가 다르니까 알아보시고 참고하셔서 해보시길바래요~
하루방  |  2015.09.14    
저는 일반팁과 오픈환경에서도 LAL assay를 진행했었고 크게 문제되지가 않았습니다.

샘플만 스탠다드에 들어 오지 않았다면 샘플에 pyrogen이 많아서 일것입니다.
팁이나 환경이 문제가 있었다면 스탠다드 자체 실험이 그레디언트하게 나오지 않았을테니까요

혹시 정제를 한 단백질이라면 꼭 pyrogen remove 를 진행하시고 LAL assay를 진행하셔야 합니다.
황금개구리안재진  |  2015.09.14   

정석인 내용을 말씀드리자면,

일단 tip은 엔도톡신 프리로 사용하셔야 합니다

왜냐면 엔도톡신은 121도, 20분간 오토클레이브해도 사멸하지 않는 발열물질이기 때문입니다.
고온인 250도에서 3시간(부정확) 해도 엔도톡신이 검출된다는 것도 들었습니다.

엔도톡신 프리 팁, 시험관 등을 구비하셔서 사용하셔야 합니다

실험환경은 꼭 클린환경이 아니고 일반 실험실에서도 하는 경우가 있더라고요.
엔도톡신은 균과는 별도의 문제로 봐서 그런지 모르겠어도.... 이부분은 저도 찜찜하지만..
여건이 가능하시다면 클린한 환경에서 해주는게 좋을것 같습니다.

SUM  |  03.20 16:53   
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