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MIC측정은 microplate에서 측정하는 실험법이 아니라 tube dilution method
를 사용하여 tube에서 측정하며 shaking하여 균이 가장 잘자라는 조건에서
측정해야 정확한값의 측정이 가능합니다
간이적으로 microplate에서 측정한다고 하더라고 실험군과 대조군의
0시간 OD값은 동일하게 나와야 합니다.
현재값은 대조군 0.038, 실험군 0.592로 동일 균수 접종이 잘못되었습니다.
그리고 1 : 1로 혼합하면 배지가 희석하여 균의 성장에 문제가 발생합니다.
따라서 항균물질을 배지에 녹여서 사용하는 것을 권장합니다.
멸균수에 녹여서 사용하려면 살제 사용농도 보다 진하게 녹여 배지에
넣었을 때 배지 희석이 최대한 안되게하는 것이 좋습니다.
정확한 MIC 측정을 위해 문헌을 한번 찾아보세요..
상당히 많은 문헌이 인터넷에 있습니다.
(출처:https://en.wikipedia.org/wiki/Minimum_inhibitory_concentration)
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레벨2
레야
(대학원생)
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19.06.24 09:40
답변 감사합니다.
대조군과 실험군의 흡광도 값이 같아야한다고 하셨는데, 접종하는 균 농도는 동일하게 넣고 있으며, 제가 시료로 사용하는 분말 자체의 색이 있기 때문에 여과를 해도 대조군 값과 2배 이상의 차이가 보입니다... 분말 색이 크게 차지하는데, 색을 제거하고 실험해야하는 건가요??
대조군 1개 및 실험군 4개의 실험 전 OD값을 측정할때 시료의 색때문에
흡광도에 간섭을 받을 경우는 시료 1개 당 실험 부피 + 1ml를 만들어
흡광도 측정 시 균 접종 후 1ml를 micro tube에 넣어서 13krpm, 5분 원심분리 후
배지를 제거하고 멸균 배지 1ml를 새로 넣어 균체를 풀어서 흡광도를 측정하면
시료에 의한 간섭을 제거할 수 있습니다.
이렇게 하는 것은 tube에서 MIC를 측정할 때 가능하고 microwell에서는 vol이
적어서 힘들겁니다.