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 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
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질문 재조합 단백질의 발현 실험이 궁금합니다.
알뿌꾸뿌꾸빵빵(과기인)  |  05.20 21:22
관련실험실 학부생입니다.
재조합 단백질(plasmid)의 발현실험을 할때
IPTG농도, 배양시간, 온도 등 다양한 조건에서 해보라고 하시는데,
실험의 그림이 잘 그려지지 않아서요..
BL21에 재조합 플라스미드를 TF해둔 상태입니다.

정확한 실험방법에 대해 설명해주시면 감사하겠읍니다.
#IPTG
 
#단백질발현
 
#재조합단백질
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

실험방법은 단순합니다.

IPTG농도는 저농도에서 고농도로 다양하게 처리해보고 단백질 프랩후 페이지를 걸어 보면 됩니다.

온도도 마찮가지로 대략 20 ~ 37도 사이 온도를 가지고 배양하면서 위에서 조건잡아진 IPTG 농도를 넣어 단백질 프랩을 해보세요

그리고 나면 배양시간을 잡아 봅니다. 위에서 조건 잡아진 IPTG농도 온도를 고정으로 놓고 IPTG를 넣고 1시간 2시간 4시간 6시간 등 차등적으로 단백질 프랩후 페이지로 확인해 보시면 됩니다.

그러나 경험상 큰 차이는 안날 확률이 높습니다.

금개구리안재진  |  05.21 13:10  
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