[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
랩박스 - Neuroscience
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3
전체보기 안전점검 논문교환
 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 351  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 PCR 결과 분석해주세요
알마라(과기인)  |  05.20 20:44

형질전환된 대장균을 PCR 돌린 후 전기영동 시킨건데

DNA증폭이 잘 되었는지 무슨 문제점이 있는지 분석해주세요

upload_image

dH2O 9.175ml
dNTP(25mM) 2ml
buffer 1.5ml
DNA 2ml(E.coli DNA)
primerF 0.5ml
primerR 0.5ml
Taqpolymerase 0.125ml
---
Total 15ml

#PCR
 
#전기영동
답변하기
검색광고 검색광고
[(주)필코리아테크놀로지] 동급제품 중 가장 경제적인 전기영동기
전기영동조와 파워모듈의 분리형 / 선택적 파워출력 35V, 50V, 100V / 타이머 내장 0~99분 / 기존 젤 케스터와 호환
[(주)필코리아테크놀로지] PCR/qPCR 실험에 사용하는 모든 시약 및 장비
빠르고 정확한 1500만원 미만의 MIC qPCR machine 으로 간편하게 데이터를 얻으세요. NEB사의 LunaScript(13분 cDNA합성완), Luna qPCR mastermix로 쉽고 정확한 데이터를 얻을 수 있습니다. cDNA합성, RT-PCR, PCR, Isothermal PCR, qPCR 관련 kit 및 시약을 모두 제공합니다.
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

ml가 ul아닌가요?

cloning 확인 용 insert를 증폭한 것이면 잘 나온것 같습니다.

별로 문제점은 없어 보입니다.

대왕개구리SPEED  |  05.20 21:13  

ul 맞아요 잘못썼네요..

그런데 어떤걸 보고 잘 된건지 알 수 있을까요

(실험 처음해본 초짜라 지식이 많이 부족해요ㅜㅜ)

알마라  |  05.20 22:27  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

전기영동은 전기영동 각각의 목적이 있습니다.

그 중에서 PCR product의 전기영동은 아래 항목을 확인하면 좋을 것

같습니다.

1. PCR target product외의 비특이 product가 없는지 확인

- 첨부 파일에서 비특이 product는 없는것 같고 primer 및 PCR 반응이

적절하게 진행된 것 같습니다.

2. 제일 밑에 있는 band는 PCR 반응 후 남아있는 primer이기 때문에

product 확인용 PCR에서는 별 문제가 되지 않고 cloning용 PCR에서는

PCR product 정제 kit를 사용하면 제거 가능합니다.

3. 전기영동 band가 가능하면 수평으로 내려가면 좋습니다.

band가 휘어진다든지 수평이 되지 않으면 gel이 균일하게 만들어 지지 않은

경우, 전기영동 전압이 강해서 빨리 내린경우이기 때문이지만 첨부 파일은

전기영동에서도 별 문제가 안보입니다.

4. band를 dectection했을 경우 최대한 gel은 검은색으로 보이며 band만

보이면 좋은데 첨부 파일에서도 band만 보이며 gel은 최대한 어둡게

보이므로 DNA 확인 용 형광 dye를 적당하게 사용한것 같습니다.

대왕개구리SPEED  |  05.21 00:21  

님의 숙제를 왜 우리더러...? 왜 부끄러움은 우리 몫인가?

BU  |  05.25 10:47   
답변하기
할인행사 광고 검색광고
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
연구실 필수템 에펜도로프 피펫 원심분리기 PCR장비 세포배양기 특별 프로모션 (7.8까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
βeta
6/6  좌우
243,800195,000
579,000463,000
49,700
489,100
69,800
187,300150,000
118,500
197,500158,000
253,900
218,200
762,200610,000
97,80078,000
109,10087,000
668,600334,000
312,000250,000
919,600736,000
121,700
254,100203,000
305,000244,000
60,70049,000
130,00065,000
24,900
82,800
59,70048,000
최근등록   더보기 >
IC50 calculation   06.18
한약재 황련 독성이 있는지 궁금합니다.   06.18
western시 transfer 문제   06.18
induction이 시간이 지날수록 줄어들 수도 있을까요?   06.18
단백질 분석별 불순물 간섭 정도   06.18
Hydroxyproline assay 관련 질문 드립니다.   06.18
western blot시 pAkt band가 나오지 않아 protocol 확인 부탁드립니다!   06.18
각기 다른 XRD 분석, 동일한 결과가 가능 한가요   06.18
각기 다른 XRD 분석, 동일한 결과가 가능 한가요   06.18
DNS method 측정값   06.18
코리아바이오믹스
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아