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 전체 > Microbiology > Bacteria
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질문 천연물 추출 문제점 알려주세요..
알jaey(과기인)  |  04.14 23:34

안녕하세요,

미생물만 하다가 천연물 추출을 하게되었습니다.

 

물과 70%에탄올을 사용하여 천연물 추출을 진행하여 항균실험을 하는데,

천연물 추출시 원물 그대로 사용(분쇄X)하여 사용 후,

감압농축하여 모두 다 비슷한 농도로 맞추어 실험을 진행하였습니다.

 

논문과 이런저런 연구 결과 참고하여 천연물 후보군을 정하고,

추출 후 항균실험을 진행하였는데, 항균효과가 하나도 없어서요...

 

균은 150ul(OD값 0.5로 맞춰 사용) 샘플은paper disc에 20ul씩 점적하는데..

샘플 점적 하는 양이 적은건가요...?

 

추출방법이 문제가 되는걸까요?

 

고수님들... 경험자분들 답변 부탁드립니다.

답답하네요ㅠㅠ

#천연물추출
 
#항균실험
 
#천연물
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

지금 천연물 후보군이 항균력이 아애 없는것은 아닌가요?

질문을 따라 가면 천연물 후보군이 항균력이 없게 나오고, 여기서 항균 시험법이나 정제법에서 고민을 하고 계신데 가설자체가 틀렸다면 뒤에 항균력이 없는건 당연한것 아닐런지요?

아니면 추출시 분쇄를 하지 않아 녹아 나온 물질이 적어 농도문제로 항균력이 없어 보일수도 있습니다. 이부분도 체크가 필요할것 같습니다.

금개구리안재진  |  04.15 11:14  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

항균력은 항균성 물질을 적정 농도로 사용하였을 때 나타남.

항균력이 나오지 않을 가능성: 항균물질 없음, 추출 조건 맞지 않음, 항균시험 조건 맞지 않음 (너무 낮은 농도)

1) 항균성 물질

- 천연물은 종류에 따라 항균성 물질의 함량, 시간당 추출 정도가 다름

- 함량은 고유의 성질이므로 중요한 건 추출 조건

- 각 물질의 추출 편차를 최소화하기 위해 균일한 크기로 만들어야 함

- 블렌더를 사용하여 각 물질을 파쇄한 후 MESH (체)를 사용하여 동일한 크기로 파쇄된 것을 사용

- 물질의 양과 추출 용매의 비율, 추출 시간은 동일하게 적용 (예, 1:5, 실온, 12 시간)

2) 적정 농도

- 저분자 물질은 분자량 1000 이하이며, 초기 스크리닝 농도는 10 uM정도로 시작함

- 분자량을 1000이라 가정하면, 1개 물질 기준으로 10 ug/ml, 천연물 1개에 약 100개의 물질이 들었다고 가정하면, 1 mg/ml, 1000개면 10 mg/ml임

- 추출물 농도를 10 mg/ml 정도 만들어 10, 1, 0.1 mg/ml로 희석하여 스크리닝 시작.

결론적으로, 추출 조건 (파쇄, 동일 입자 크기 및 추출 시간)을 통일하여 추출 후, 10 uM 농도에서 항균 시험 추천 드림. 항균 물질이 있는 것으로 알려진 것을 positive control로 추가.

뒷다리DTer  |  04.15 16:51  
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