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 전체 > Molecular Biology-Protein > Extraction/Isolation
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질문 Cell fractionation 방법 질문입니다
알hy(대학원생)  |  04.14 23:05
실험실 초보입니다 혼자 실험을 해야하는 상황이라 막막합니다 구글링을 해도 방법이 다양해서 초짜인 제가 구분하기 너무 어려워 브릭에 도움을 청해봅니다

실험은 cell에서 특정 단백질을 보려고 핵, 미토콘드리아, cytosol로 나누어 제가 찾고자 하는 단백질이 어디에 많은지 알아보려는 것입니다
Cell fraction을 해서 western을 해야 하는데

cell fraction 할때 RIPA buffer를 어느 과정에 써야하는지 다른 buffer는 뭘 써야 할까요
그리고 sonicator? 라는 것도 사용해야 할까요?

Cell fractionation에 대해 공부할 수 있는 책이나 사이트 있다면 추천 부탁드립니다
#Cell fraction
 
#Protein
 
#Fractionation
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

Cell fractionation을 하려고 할 때 RIPA lysis buffer는 사용하면 안됩니다. RIPA lysis buffer는 세포막도 모두 녹여버리기 때문에 mitochondria와 nuclear fraction을 얻을 수 없습니다.

요즘은 fractionation을 위한 kit가 많이 나와있으니 그것을 구매해서 사용하는 것이 좋을 것입니다. 우리도 판매되는 kit를 사용하고 있습니다. 사용되는 기구는 회사마다 조금씩 다르긴 합니다만, 유리로된 dounce homogenizer (또는 dounce grinder라고 부름)는 있어야될 것입니다.

개구리식스센스  |  04.15 09:04  
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