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 전체 > Molecular Biology-RNA > Purification/Isolation
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질문 Trizol, RNA 추출키트 어떤게 좋을까요?
알우리가 정의(대학원생)  |  03.13 08:35
안녕하세요

human cell에서 RNA를 뽑으려고 합니다.

1. 내용을 찾아보니까 trizol 대신 kit를 사용하면 purity는 좋지만 수득율은 낮다고 하는데 그래도 쓸만한 양은 얻을 수 있을까요?

이전까지는 trizol 사용했었고 cDNA합성은 RNA가 1ug이 되게 합성합니다.

2. kit를 사용한다면 qiagen사의 RNeasy mini kit 써보려고 하는데 괜찮겠지요??

3. 보통 연구자분들께서는 trizol 방법이랑 kit중에 어느것을 더 선호하시나요?
#RNA
 
#lsolation
 
#extraction
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채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

1. 내용을 찾아보니까 trizol 대신 kit를 사용하면 purity는 좋지만 수득율은

낮다고 하는데 그래도 쓸만한 양은 얻을 수 있을까요?

: mRNA 추출 용도에 따라 달라지겠지만 cDNA cloning에는 양이 필요하지만

qPCR용이면 양보다 순도가 중요하지 않을까 합니다.

TRIZOL이나 kit나 실험에 문제가 되지는 않을거라 생각합니다.

2. kit를 사용한다면 qiagen사의 RNeasy mini kit 써보려고 하는데 괜찮겠지요??

: Q사 제품은 사용하지 않지만 별 문제 없을겁니다.

가격대비 성능이 좋은 kit는 많이 있습니다.

3. 보통 연구자분들께서는 trizol 방법이랑 kit중에 어느것을 더 선호하시나요?

: 저의 경우 예전에는 TRIZOL을 많이 사용했지만 최근에는 kit를 많이

사용합니다.

대왕개구리SPEED  |  03.13 11:56  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

human cell에서 RNA를 뽑으려고 합니다. 

1. 내용을 찾아보니까 trizol 대신 kit를 사용하면 purity는 좋지만 수득율은 낮다고 하는데 그래도 쓸만한 양은 얻을 수 있을까요? 

: 저는 Human과 Mice 둘 모두의 cell에서 RNA를 뽑아봤습니다.

보편적으로, kit를 사용하면 더 좋은 purity나 수득률을 얻을 수 있다라고 생각합니다. 어느정도 일리는 있지만, Trizol 방법 역시 kit와 비슷한 purity와 수득률을 얼마든지 뽑을 수 있다는 것입니다.

kit의 장점은 제가 보기엔 간단함 이라고 생각합니다. 그것을 제외한 나머지는 해당 실험자가 얼마나 숙련된 실험을 이행하느냐가 결과에 반영되는 것 같습니다.

제가 Human cell을 동량으로 Trizol과 QIAGEN kit를 사용해서 뽑아 본 결과 purity와 수득률에서 많은 차이는 보이지 않았습니다.

 

2. kit를 사용한다면 qiagen사의 RNeasy mini kit 써보려고 하는데 괜찮겠지요?? 
 

: 보통은 QIAGEN 제품이 잘 알려져 있습니다. 사용하셔도 괜찮습니다. 저도 RNA prep할 때, QIAGEN 또는 Invitrogen 제품을 주로 사용하였습니다.


3. 보통 연구자분들께서는 trizol 방법이랑 kit중에 어느것을 더 선호하시나요?

: 보통의 연구자 기준에서는 Trizol 보다 kit를 선호합니다. Trizol은 인체 유해성과, kit protocol 과 비교해봤을때 시간이 다소 많이 들어간다는 단점이 있기 때문입니다.

 

개구리지나가는사람  |  03.13 14:10  

ZymoResearch한국 공식 수입원 경신과학(주)입니다.

 

Trizol류의 페놀시약의 장점은 전통적인 검증된 방식, 한번에 많은양을 핸들링할 수 있음, phenol시약의 강력한 Lysis , 저렴한 부분이 있고 단점으로는 층분리과정의실험이 어렵고 오래걸림, Phenol시약자체의 Contamination으로 인한 PCR inhibition이 있습니다.

 

kit류는 일반적으로 층분리법과 비교하여 가격이 비싸고, 한번에 많은 양을 핸들링 하긴 어려우나 쉽고 빠르고, 정형화된 실험법으로 인하여 에러를 줄일 수 있는것이 장점입니다.

 

ZymoResearch에서는 이런 두가지 방식의 장점을 융합한 Direct-zol RNA miniprep(http://www.kyongshin.com/productview.php?pd_id=96)이라는 제품을 보유하고있습니다

해당제품은 Trizol샘플에서 층분리과정 없이 Spin-Column을 이용 단 7분만에 RNA를 추출하는 제품입니다. 

제품의 품질에 대해서는 강력히 추천드리며, 테스트 할 수 있는 샘플키트를 제공 가능하오니 궁금하신점이나 요청할 부분 있으시면 언제든지 연락 주시기 바랍니다

T)02-576-6303

mail) info@kyongshin.co.kr

 

kyongshin  |  03.15 13:54   
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