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 전체 > Molecular Biology-DNA > Transformation
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질문 DH5알파를 사용하는 이유
알sss456(과기인)  |  03.12 16:51

transformation 할때 com.cel로 BL21아닌 DH5알파를 쓰는 이유가 있나요> 더 그렇다면 비교하여 그 이유가 뭔지 알려주세요 ㅜㅡㅜ

#transformation
 
#BL21
 
#DH5알파
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

일반 cloning 실험에는 endA1, recA1 gene이 제거된(DH5a 등) 균주를

사용해야 합니다.

위 두개의 유전자는 유전자 재조합 효소 및 endonuclease이며 외부 유전자의

변형을 일으킬 가능성이 있기 때문에 안정적으로 외부 유전자를 세포내에

유지하려면 위 2개 유전자가 제거된 균주를 사용하는것이 좋습니다.

대왕개구리SPEED  |  03.12 16:53  

저는 위의 내용은 몰랐습니다만.

제가 알기로는 두 Strain은 DNA를 품을 수 있는 Copynumber가 틀립니다.

 

 BL21은 Protein expression을 위한 tRNA codon들이 추가된 Strain이고

copynumber가 낮아서 Cloning에 쓰기에는 부적절합니다.

예를들어 BL21으로 Cloning을 한다면, 물론 되겠지만.. 나중에 DNA를 뽑아서 Transfection을 할 일이 생긴다면 상대적으로 적은 DNA들이 뽑힌다는거지요

DNA를 얻기 위한 DNA prep에서 DNA의 양이 적게나온다면 안되겠죠?

 

제가 쓴 내용이 더 궁금하시면 클로닝 끝나고 나서 각각 DNA를 BL21과 DH5a에 transformation 해서 콜로니를 하나씩 pick up 한뒤에 DNA mini prep을 해보세요~ 아마 서로 다른양의 DNA들이 추출될겁니다.

 

도움이 되셨기를.. 

 

 

올챙이판다의브레인  |  03.17 17:11  

plasmid copy No.는 plasmid ori(복제기점)에서 결정됩니다.

대왕개구리SPEED  |  03.17 17:17  
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