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 전체 > Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
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질문 MTT assay 값을 어떻게 계산하나요?
올챙이연연(대학원생)  |  03.12 03:43

MTT assay를 하고 있습니다. 10mg MTT reagent를 10:100ul 비율로 처리하고 4시간 후에 solvent를 처리한 후에 overnight을 한 후 590nm를 측정합니다.

 

그 후에 MTT valve를 control값을 모든 값에 나눠준후 control을 1만들어서 relative value를 사용하고 있는데요. 모든 세포가 죽는 실험군의 valuerk 0.4정도가 나옵니다. 교수님께서 그 데이터를 보시고 세포가 모두 죽으면 value가 0에 가깝게 나와야하는데 이 문제를 해결하라고 하시네요. 혹시 코멘트를 좀 주실 수 있으신지요?

#MTT
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

모든세포가 다 죽었다는 가정하에서...

모든 세포가 죽는 그룹의 값을 공통적으로 다 빼주면

0.4 정도로 나오는 그룹은 0에 가깝게 될것 같습니다.

제가 질문은 잘 이해했는지 모르겠네요

금개구리안재진  |  03.12 10:58  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

실험에 control, treatment, blank 다 OD값 측정하셨나요??

 

그냥 treatment/control로 나누는게 아니라

(treatment - blank)/(control-blank)로 해야 0이 나옵니다.

 

blank는 셀 없는 조건에서 같은 양의 미디어+MTT로 찍히는 흡광도 입니다.

coldi11@hanmail.net  |  03.12 11:00   

정확한 답변 정말 감사합니다. Blank를 해야하는지 몰랐습니다.

이렇게 도움주셔서 감사합니다.

올챙이연연  |  03.12 23:37  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

세포 넣지 않은 배양 배지에 동일하게 mtt 시약 넣으신 조건을 흡광을 찍은 후

그 값을 모든 sample에서 제외시킨 후 control 대비 relative 값을 구하시면

될 듯 합니다.

 

지나가다  |  03.14 17:48   
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