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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 96 well plate
알xekh13(대학생)  |  03.11 08:56
안녕하세요 석사 초반의 대학원생입니다.
96 well plate에 hep3b gfp lc3 cell을 까는데
Well마다 cell 양도 다 다르고 well마다 필요한 cell의 적당한 양을 찾는 것도 어렵네요..

well마다 media를 100ul씩 깔아주고 있는데요.

hematocytometer를 이용해 카운팅해서 well마다 5000개 정도의 cell를 넣어주기도 했는데 카운팅이 잘 안되었는지 cell의 양이 또 많기도 했고..
multi pipette을 이용하는데 파이펫팅이 익숙하지 않은것 같기도 하고..

주저리 썼는데 궁금한건

1.well마다 균일한 양으로 cell을 까는방법(multi pipette 잘 활용하기)
2. well마다 적절한 세포의 양

입니다 답변부탁드립니다 감사합니다
#96 well plate
 
#multi pipette
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/references/gibco-cell-culture-basics/cell-culture-protocols/cell-culture-useful-numbers.html

plate 에 따른 일반적인 cell number입니다.

그렇지만 이는 일반적인 숫자일뿐 사용하시는 셀의 크기등 특성에 맞게 하셔야 합니다.

또 경험상 cell 희석은 너무 적은 부피에 하시면 균일하게 혼합이 어렵습니다. 남더라도 넉넉하게 셀을 준비하시는게 편차를 줄이는 방법입니다.

금개구리안재진  |  03.11 10:22  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

1.well마다 균일한 양으로 cell을 까는방법(multi pipette 잘 활용하기)

: micropipette 사용은 개인적인 연습을 충분히 해서 스킬을 올리는 방법밖에

없습니다.

2. well마다 적절한 세포의 양 

: 실험에 사용하는 모든세포는 실험 목적 별 필요로 하는 cell 양과 배양 시간이

모두 다르기 때문에 case-by-case로 적용해야 할 문제입니다.

대왕개구리SPEED  |  03.11 11:29  
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