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질문 BL21 competent cell
알Doo(일반인)  |  03.10 20:45

BL21(RIL) competent cell을 키워서 test 차 전기충격을 주어 유전자를 집어넣은 다음 LB+Km 카나미이신 배지에 spread 하였는데 com cell이 하나도 안 자랐어요

형질전환이 안된 것이 문제겠지만 어디가 문제인지 잘 모르겠습니다

전기충격을 줄 때에도 스파크가 발생하지 않고 적절하게 잘 진행된것 같고 배지에 spread 할때에도 사용한 삼각봉을 충분히 식혀서 사용했는데 왜 안될까요??

정말 1도 안자랐어요ㅠㅠ

 

#BL21(RIL)
 
#competent cell
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

여러가지를 확인해야 합니다.

사용하신 plasmid에 카나마이신 마커가 있는가? 를 확인하세요.

컴셀을 그냥 LB 배지에 깔고,

컴셀을 카나마이신 LB 배지에 깔고,

컴셀에 카나마이신 마커를 가진 plasmid를 형질전환 한것을 둘로 나눠서 LB 배지와 LB+카나마이신 배지에 깔고

결과를 보세요.

대왕개구리강시  |  03.11 09:04  

electrophoration 경험이 어느정도인지 모르겠지만 cell을 몇시간 정도

배양해서 electrophoration에 사용했나요?

대왕개구리SPEED  |  03.11 11:55  
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