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 전체 > Cell Biology > Transfection
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질문 human cell에 co-transfection 하고싶습니다!
올챙이Mintsun(대학원생)  |  02.11 23:46

안녕하세요!

Human cell에 co-transfection을 하려고하는데요

제가 알고 있는게 맞나요?ㅎ

100mm dish기준으로
Vector control : pcDNA3.1(+)  4ug
A gene : pcDNA3_flag_A유전자 4ug
B gene : pcDNA3.1(+)_B 유전자 4ug
A+B : pcDNA3_flag_A유전자 2ug + pcDNA3.1(+)_B 유전자 2ug

이런식으루 하면 되나요???

아니면

100mm dish기준으로
Vector control : pcDNA3.1(+)  4ug
A gene : pcDNA3_flag_A유전자 2ug + pcDNA3.1(+)  2ug
B gene : pcDNA3.1(+)_B 유전자 2ug +  pcDNA3.1(+)  2ug 
A+B : pcDNA3_flag_A유전자 2ug + pcDNA3.1(+)_B 유전자 2ug

이렇게 하는게 맞나요??

선배님들 께서는 어떤식으로 하시는지 궁금합니다!! 감사합니다.

#transfection
 
#co-transfection
 
#IP
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채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

우선 transfection reagent가 추천하는 농도는 100mm dish에 4ug인걸로 알고 답변드리겠습니다.

두번째 방법으로 하시는게 맞습니다.

100mm dish기준으로
Vector control : pcDNA3.1(+)  4ug
A gene : pcDNA3_flag_A유전자 2ug + pcDNA3.1(+)  2ug
B gene : pcDNA3.1(+)_B 유전자 2ug +  pcDNA3.1(+)  2ug 
A+B : pcDNA3_flag_A유전자 2ug + pcDNA3.1(+)_B 유전자 2ug

A, B only에 vector control 2ug이 추가적으로 들어가는게 찝찝하시다면
이 실험그룹에서 vector control : pcDNA3.1(+) 2ug 하나 더 추가시켜서 해보시길 권장합니다.

첫번째 방법은 A, B gene only에서 4ug인데 co-transfection에서 각각 절반으로 줄어들기 때문에 비교하기 적절하지 않습니다.



올챙이지나가던사람  |  02.12 16:17  
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