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질문 agarose gel 전기영동 사진
알졸업좀..(대학원생)  |  01.11 16:14
첨부파일 파일첨부: 20190111165652.jpg (330 KB)
이미지 첨부파일

젤 전기영동 일부 사진을 올렸는데요..

밴드 강도가 희미해서 젤닥 노출을 2m/s이상으로 올리면 밴드 크기가 450bp인데

보기 힘들게 저렇게 찍히네요..

솔루션이 있다면 답변 부탁드립니다..ㅠ

#젤 전기영동
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

사진이 reverse로 나왔는데 2m/s는 당연히 저렇게 나옵니다.

이렇게 band 감도가 낮을 경우는 EtBr고 같은 형광 시약을

전기영동 buffer나 gel에 넣고 실험하면 안되고 sample에 넣고 loading하면

됩니다.

사진은 5sec, 10sec 정도만 해도 충분히 깨끗하게 나올겁니다.

노출을 늘일 때는 marker도 평소보다 1/3~1/6 정도 양을 줄여서 loading하면 전체적으로

확인하기 편하게 사진이 나옵니다. 

대왕개구리SPEED  |  01.11 16:24  
Neogreen이나 etbr 넣은 젤을 미리 만들어 놓고 오래 놔둬도 비슷할걸요
꽃개구리Applied_Microbe  |  01.11 19:48  

적은양은 DNA를 사진촬영 할때는 조리개를 오래 열어야 하는데 이렇게 찍으면

back ground가 같이 노출되기 때문에 sample에 염색시약을 넣는게 노출 시간을

늘였을 때도 band만 깨끗하게 나옵니다.

그리고 gel에 염색시약을 넣고 전기영동한 후 gel에서 시간을 두고 염색 시약을 빼도 되지만

이런경우 band도 gel에서 확산됩니다.

전기영동 직후 바로 찍은 band 보다 sharpness가 떨어집니다.

대왕개구리SPEED  |  01.11 20:08  
Neogreen 이나 etbr을 넣은 gel을 오래보관하다가 전기영동 샘플걸면 band는 퍼지지 않고 흐리게 나와요

사이즈마커도 흐리게 나오고요
꽃개구리Applied_Microbe  |  01.11 23:15  
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