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 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
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질문 Ligation문의 드립니다
알florentia(대학원생)  |  01.10 00:10
Vector사이즈 3,000bp Insert 사이즈 1,100bp인데 vector와 Insert 사이즈 몇배율로 해야하는지 문의드립니다.
#Ligation
 
#Vector
 
#Insert
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

V : I = 1 : 3 말단 비율로 하면 무난 할 겁니다.

그렇다고 1 : 2나 1 : 4 비율로 한다고 실험에 문제가 있지는 않습니다.

혼합하는 양은 분자량이 거의 3배 차이가 나기 때문에 vector와 insert를 동일양 사용하면

말단 비율이 약 1 : 3이 됩니다.

정확하게는 V와 I의 분자량 차이가 2.73배 나기때문에 동일양을 혼합하면 말단 비율이

1 : 2.73이 됩니다.

따라서 1 : 3을 맞추려면  vector 0.1ug 사용 시 insert는 0.11ug 사용하면 됩니다.

대왕개구리SPEED  |  01.10 00:19  
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