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질문 균 MIC...? IC50
뒷다리디룽(대학원생)  |  12.07 00:05
첨부파일 파일첨부: 상대생장률.png (12 KB)
이미지 첨부파일

천연물로 Malssezia에 항균활성 실험을 하고 있습니다.
여기 관련 지식이 없어서 질문 올립니다..
tube에 각 균주를 일정 탁도를 동일하게 맞춰서 배양 후 천연물을 주입하여 배양한 후 흡광도 값을 측정하여 control (배지+균)대비 상대 생장률을 구해 그래프를 그렸습니다.
X축은 농도, Y축은 상대 생장률을 나타낸 것입니다. MIC 값을 구하려니 농도를 더 낮춰야 할 것 같아 IC50값을 구하려고 0.05~0.1 사이에 추세선을 그어 식에 값을 대입하여 IC50값을 산출하였습니다. 여기서 IC50라는 용어를 쓰는것이 맞는건가요 ? 그리고 그렇게 구하면 되는 것일까요 ?.. 실험의 방향을 모르겠네요 .... 농도 설정부터.......................,,,, 
조언부탁드립니다.

#mic
 
#항균실험
 
#IC50
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채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
첨부파일 파일첨부: IC50.gif (5 KB)
이미지 첨부파일

먼저 IC50의 정의를 살펴보면 Half maximal inhibitory concentration입니다.

즉, 50% 저해되는 농도로 보면 됩니다(첨부 그림 참조).

따라서 현재 결과에서 IC50을 구하기는 힘듭니다.

원래 IC50을 구하는 실험은 한번에 구할 수는 없구요..

처음에는 처리 농도의 간격을 조금 넓게 해서 inhibition 경향성을 보고 IC50이 나올

가능성이 있는 범위를 구하여 재 실험합니다.

현재 그래프는 정상적으로 나왔고 0.05 ~ 0.1 사이에서 IC50이 나올겁니다.

만약 제가 실험을 한다면 다음 실험은 0.05 / 0.06 / 0.07 / 0.08 / 0.09 / 0.1의 농도로

측정해 볼것 같습니다.

단, 농도 별 range가 좁기 때문에 편차가 크게 발생 할 가능성이 높고 각 농도 별 n수를

최소 3개 이상을 하는게 바람직합니다.

현재 결과로 계산해 보면 0.06 ~ 0.07 정도에서 IC50이 나올것 같습니다.

첨부 결과는 잘못나온 결과가 아니며 range를 좁혀서 재실험하면 좋은 결과가 나올겁니다.
 

금개구리SPEED  |  12.07 00:50  

매번 답변 감사드립니다 ㅠㅠㅠ 
물어볼 곳이 없었는데 흐규규 range를 줄여서 재실험을 해보도록 하겟습니다!! 

뒷다리디룽  |  12.07 01:27  

ㅠㅠㅠ 그래프를 그리는데 농도 계산에 혼란이 생겨 다시 질문올립니다 ㅠㅠㅠ....ㅠㅠ
제가 균을 5ml에 동일하게 분주하고,,,,,  항균테스트할 시료를 주입을 하는데 만약에 5%로 만들어논 시료를 (50mg/ml) 300ul를 넣었으면 X 축에 기입할 최종농도가 몇이 되는건가요 ??? 원래 MIC TES를 할때 시료의 양을 얼마나 주입하는지는 상관이 없는건가요 ? ㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠ 머가뭔지,, 도와주세용 ㅠㅠ 

뒷다리디룽  |  12.07 17:39  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

-제가 균을 5ml에 동일하게 분주하고,,,,,  항균테스트할 시료를 주입을 하는데
만약에 5%로 만들어논 시료를 (50mg/ml) 300ul를 넣었으면 X 축에 기입할
최종농도가 몇이 되는건가요 ???

: 5% 농도의 시료를 300ul 넣으면 ml에 60ul가 처리되기 때문에 농도는 3mg/ml
입니다.

-원래 MIC TES를 할때 시료의 양을 얼마나 주입하는지는 상관이 없는건가요 ? 

: 농도별로 처리하는게 가장 중요한 실험 원리입니다.

그리고 예들들어 5개의 농도 별 시료를 처리하기 위하여 tube를 준비했다면

배지 vol. 4.94ml   4.89ml    4.84ml    4.79ml    4.74ml    

균체 vol. 10ul      10ul        10ul       10ul      10ul

시료 vol. 50ul     100ul      150ul     200ul     250ul

위의 조성같이 모든 걸 혼합한 후 final vol.은 동일하게 해야합니다.


금개구리SPEED  |  12.07 17:49  

답변 너무 감사드립니다,,
그런데 배지를 넣는 볼륨이 너무 크다보니까 조금 편하게 하기위해서 
배지 5ml에 동일하게 탁도를 맞춘 균을 동일량을 주입하고 시료를 따로 농도별로 만들어 놓은 것을 같은 양을 주입하려고 합니다...,, 이렇게 되서 계산에서 계속 막히게 되는 것 같은데 .. 이렇게 해도 될까요 ???? 

뒷다리디룽  |  12.07 18:26  
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