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질문 E.coli 단백질 over expression
올챙이퉁기퉁기(과기인)  |  2018.12.03 19:22

안녕하세요 몇가지 질문이 있어서 이렇게 문의 드립니다. 

E.coli에서 단백질을 과발현 시키고 싶은데 혹시 방법이 있을까요? 


또한 E.coli에서 과발현 시키는 것과 식물체에서 과발현 시키는 것을 서로 비교하여 효율성을 따져보고 싶은데 그 방법이 궁금합니다. 


감사합니다. 

#E.coli
 
#plant
 
#단백질
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

대장균 발현 벡터에 유전자를 연결하여 IPTG 등과 같은 것을 유도제로 사용하여

과발현 가능합니다.

그리고 단백질 발현에 사용되는 system의 선택 범위가 대장균쪽이 상당히 넓습니다.

식물은 대장균에 비하여 사용 가능한 발현 시스템이 제한적입니다.

식물과 대장균에서의 발현 효율은 무엇을 목적으로 하느냐에 따라 달라집니다.

단백질양은 비교할수 없을 정도로 대장균 발현양이 높습니다.

그러나 목적 단백질이 고등세포 유래 단백질이면 식물에서 발현하는 것이

단백질 활성적인 측면에서 훨씬 유리합니다.

그리고 진핵세포와 원핵세포의 단백질 발현에서 가장 큰 차이점 중의 하나는

post-translation modification이 진핵세포에서 상당히 복잡하게 일어납니다.

금개구리SPEED  |  2018.12.03   

여기 브릭에 많이 올라오는 expression system은 pET 시스템을 많이 이용하는듯 합니다.
많은 단백질이 발현율은 상당히 높습니다.
그러나 단백질 발현율이 높다해서 활성도 높은것만은 아닙니다. inclusion body로 많이 생성되기하기 때문입니다.

질문자가 말하는 효율성이라는게 어떤 의미인지는 모르겠지만 만약 발현양을 말하는것이라면 미생물을 이용한 단백질 발현이 확실히 좋을것입니다.

그리고 방법은 https://research.fhcrc.org/content/dam/stripe/hahn/methods/biochem/pet.pdf

https://www.qiagen.com/mx/resources/resourcedetail?id=79ca2f7d-42fe-4d62-8676-4cfa948c9435&lang=en

위 2개 문서를 한번 보시면 이해가 빠르실것 같습니다.


금개구리안재진  |  2018.12.04   
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