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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 웨스턴 블랏 결과 질문입니다!!
알루루리랄라(과기인)  |  12.02 21:56
첨부파일 파일첨부: 1543755047396.jpg (1.26 MB)
이미지 첨부파일
현재 웨스턴을 갓 배우고 있는 학생입니다

앞에서부터 순서대로 293A 두개 PANC-1 두개 DH5a 두개 이렇게 해서 웨스턴 블랏을 진행 한 결과입니다.

1st Ab는 GAPDH를 사용했고 2nd는 mouse anti- rabbit을 사용했습니다

근데 DH5a만 밴드가 위로 튀어있더라구요ㅠ
저 결과가 맞는건지 왜 저렇게 결과가 나온건지 잘 모르겠어요
결과 분석 좀 도와주세요!
#웨스턴블랏
 
#웨스턴
 
#Western
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

293A와 PANC-1은 mammalian cell이고 DH5a는 대장균입니다.

mammalian Ab로 prokaryotic Ag를 WB하는 것은 올바른 실험은 아닙니다.

mammalian cell과 대장균의 GAPDH는 2Kda정도 차이가 나고 거의 같은

위치에 나온는게 정상입니다만..

그러나 mammalian polyclonal Ab가 대장균 GAPDH를 detection 해줄지는 모르겠네요..

금개구리SPEED  |  12.02 22:22  
답변 감사합니다!
한가지 더 질문해도될까요

그렇다면 비슷한 위치에 밴드가 나타나야 한다는 것인데
같은 실험을 한 다른 학생도 저와 같이 DH5a만 튀어 결과가 나왔다면 cell에 문제가 있는걸까요??
알루루리랄라  |  12.03 00:14  

그렇다면 비슷한 위치에 밴드가 나타나야 한다는 것인데 같은 실험을 한 다른 학생도

저와 같이 DH5a만 튀어 결과가 나왔다면 cell에 문제가 있는걸까요??

: Ab 종류하고 Ag 종류가 match되지 않기 때문에 가령 비슷한 위치에서 band가 나온다고

해도 신뢰성을 부여 할수 있을지 모르겠네요..

DH5a의 band는 무의미한 결과라고 생각하는게 좋을 것 같습니다.

금개구리SPEED  |  12.03 00:20  
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