[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
BRIC을 시작페이지로 회원가입    로그인
BRIC실험
   
통합검색
배너1 배너2 스폰서배너광고 안내
오늘의 BRIC정보
모바일 BRIC RSS
트위터 페이스북
검색 뉴스레터 안내
좋은 연구문화 만들기
Bio일정
Bio일정
 
Bio일정 프리미엄(유료) 등록이란?
세미나 VOD
실험
실험
바이오 형광사진
실험의 달인들
Bio마켓
Bio마켓
BioJob
BioJob
Biojob 프리미엄(유료) 등록이란?
커뮤니티
커뮤니티
전체메뉴
대메뉴안내: 실험
실험 QnA 안전점검 논문교환
 전체 > Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
조회 251  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Facs) fixed cell 을 이용한 apoptosis 확인
알연구원나부랭이(과기인)  |  09.12 11:13
안녕하세요 
현재 BD사의 Annexin V & PI double staining kit를 이용하여 
facs로 apoptosis를 확인하는 실험을 하고 있습니다. 

저희 회사에 장비가 없어 협약된 학교에서 실험을 할 수 있는데 
cell sample을 가지고 1-2시간 이동하다보니 
그 사이에 세포들이 손상되어 측정값을 제대로 구할 수 없더라구요 

그 전에 pi staining으로 cell cycle을 찍을때는 다행이 fix 과정이 있어서 가능했는데...

혹시, 아래의 방법을 알려주실 수 있을까요 ?
 1) Annexin V & PI double staining 시 fix 하는 방법 or 프로토콜
 2) 다른 apoptosis 확인법 (facs 장비이용)

실험 고수님, 박사님, 연구원님들 부탁드립니다 ^^
#apoptosis
#flow cytometry
#fixation
답변하기
검색광고 검색광고
[두젠바이오] 정확하고! 간편하고! 빠르게 cell viability,proliferation,cytotoxicity assay를 할 수 있는 EZ-Cytox!
MTT를 대체하여 간편하고 빠르게 cell viability,proliferation,cytotoxicity assay를 할수 있는 시약입니다. 오랜시간동안 실험자분들께 검증받은 WST 기반의 EZ-Cytox. 아직까지 사용을 못해보셨다면 sample을 신청해 보세요. *문의: 02-2081-1526
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
 거친 방법이긴 하지만, PI만으로 staining 해서 cell cycle 분석을 하면, sub-G1으로도
대략적으로 necrotic cell death 와 apoptotic cell death 를 구분할 수 있습니다..
죽을 때 DNA가 부서지는 방식이 다르기 때문에요..

그리고 A-V와 PI로 staining을 하시고 A-V binding buffer에 1-4% 농도의 파라포름알데하이드를
섞어서 고정시키는 방법이 있습니다..

그런데 정말 추천드리는 방법은 아니고 그렇게라도 실험을 해야 하는 상황이라면 저런 방법을
쓸 수도 있다 정도입니다.
...  |  09.12 15:29   
...님 감사합니다. 
A-V binding buffer에 1-4% 농도의 파라포름알데하이드를 고정시키는 방법을 적용 할 수 있을것 같은데
혹시, 염색을 하루 전에 하고 다음날 detection해도 안정할가요 ?? 
알연구원나부랭이  |  09.13 09:18  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
 됩니다, 그러나 단순히 cell cycle 분석을 위해 메탄올 등으로 고정하는 경우에도 너무 오래 두지 않는 것이 좋은 결과를 주듯 마찬가지입니다.

...  |  09.14 23:13   
답변하기
할인행사 광고 검색광고
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[Implen] NanoPhotometer 특가 판매 이벤트 : RNA to Protein 모든 범주 빠른 정량 가능/나노정량 분광광.. (11.30까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
Advantage 행사:피펫 디스펜서,원심분리기,초저온냉동고 특별혜택/PCR 및 분광광도계 보상판매/CellCulture.. (1.18까지)
최근등록   더보기 >
Rnase A stock만드는거 질문있습니다   11.20
페놀 황산법에 의한 총당 측정   11.20
coculture할 때의 cell line 정하는데 궁금한 점이 있어요.   11.19
T-DNA genotyping pcr에서 RB primer가 아닌 보통 LB primer를 쓰는 이유   11.19
미생물 실험시 N.D.   11.19
siRNA의 ethanol precipitation에서 dry를 어떻게 하시나요?   11.18
IncompleteAdjuvant양   11.18
단백질 발현 IPTG   11.18
DNA 밴드 실험결과 햇갈려서 해석 부탁드립니다.   11.17
MCF-10A cell 관련하여 도움을 얻고자 합니다 ㅠ.ㅠ...   11.17
한국벡크만쿨터
투표진행
Q. 웨스턴 할때 tissue preparation 해논 sample 을 어떻게 보관하시는지요?
참여하기
ZEUS
이전페이지로 돌아가기 맨위로 가기
 

BRIC 홈    BRIC 소개    회원    검색    문의/FAQ    광고    후원
Copyright © BRIC. All rights reserved. Contact member@ibric.org

 
에펜도르프코리아