[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
BRIC을 시작페이지로 회원가입    로그인
BRIC실험
   
통합검색
배너1 배너2 배너3 배너4 스폰서배너광고 안내
오늘의 BRIC정보
모바일 BRIC RSS
트위터 페이스북
검색 뉴스레터 안내
좋은 연구문화 만들기
Bio일정
Bio일정
 
Bio일정 프리미엄(유료) 등록이란?
2018년 6월달 Bio일정을 확인하세요.
실험
실험
바이오 형광사진
실험의 달인들
Bio마켓
Bio마켓
BioJob
BioJob
Biojob 프리미엄(유료) 등록이란?
커뮤니티
커뮤니티
전체메뉴
대메뉴안내: 실험
실험 QnA 안전점검 논문교환
 전체 > Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
조회 662  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Facs) fixed cell 을 이용한 apoptosis 확인
알연구원나부랭이(과기인)  |  2017.09.12 11:13
안녕하세요 
현재 BD사의 Annexin V & PI double staining kit를 이용하여 
facs로 apoptosis를 확인하는 실험을 하고 있습니다. 

저희 회사에 장비가 없어 협약된 학교에서 실험을 할 수 있는데 
cell sample을 가지고 1-2시간 이동하다보니 
그 사이에 세포들이 손상되어 측정값을 제대로 구할 수 없더라구요 

그 전에 pi staining으로 cell cycle을 찍을때는 다행이 fix 과정이 있어서 가능했는데...

혹시, 아래의 방법을 알려주실 수 있을까요 ?
 1) Annexin V & PI double staining 시 fix 하는 방법 or 프로토콜
 2) 다른 apoptosis 확인법 (facs 장비이용)

실험 고수님, 박사님, 연구원님들 부탁드립니다 ^^
#apoptosis
#flow cytometry
#fixation
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
 거친 방법이긴 하지만, PI만으로 staining 해서 cell cycle 분석을 하면, sub-G1으로도
대략적으로 necrotic cell death 와 apoptotic cell death 를 구분할 수 있습니다..
죽을 때 DNA가 부서지는 방식이 다르기 때문에요..

그리고 A-V와 PI로 staining을 하시고 A-V binding buffer에 1-4% 농도의 파라포름알데하이드를
섞어서 고정시키는 방법이 있습니다..

그런데 정말 추천드리는 방법은 아니고 그렇게라도 실험을 해야 하는 상황이라면 저런 방법을
쓸 수도 있다 정도입니다.
...  |  2017.09.12    
...님 감사합니다. 
A-V binding buffer에 1-4% 농도의 파라포름알데하이드를 고정시키는 방법을 적용 할 수 있을것 같은데
혹시, 염색을 하루 전에 하고 다음날 detection해도 안정할가요 ?? 
알연구원나부랭이  |  2017.09.13   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
 됩니다, 그러나 단순히 cell cycle 분석을 위해 메탄올 등으로 고정하는 경우에도 너무 오래 두지 않는 것이 좋은 결과를 주듯 마찬가지입니다.

...  |  2017.09.14    
답변하기
할인행사 광고 검색광고
정코퍼레이션 정코퍼레이션
Cryo Label Printer (바코드프린터) 지금 구매하시면 라벨지 1000매를 1개 더 드립니다! (6.30까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
피펫,원심분리기,PCR장비,분광광도계,초저온냉동고:프리미엄 Eppendorf 제품을 다양한 혜택과 함께 만나보.. (7.1까지)
최근등록   더보기 >
4X SDS Sample buufer 조성 맞는지 확인 부탁드립니다!   05.28
Co - solvent의 이점에 대해서 궁금합니다.   05.28
cell subculture 기간 질문   05.28
물이끼 에탄올 추출법   05.28
지방조직으로부터 지방세포 분리 방법   05.28
mouse 경구 투여 용량 및 시료량 계산 부탁드립니다.   05.28
프리즘6 사용중에 두가지 데이터를 한 그래프에 나오게 하는 방법 질문입니다.   05.28
RIN 값   05.28
Delayed-onset apoptosis 라는 단어가 궁금합니다   05.28
효소 분주할 때 사용할 수 있는 buffer   05.27
영화과학
ZEUS
이전페이지로 돌아가기 맨위로 가기
 

BRIC 홈    BRIC 소개    회원    검색    문의/FAQ    광고    후원
Copyright © BRIC. All rights reserved. Contact member@ibric.org

 
에펜도르프(T:1577-4395)