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한반도 자연생태 사진 공모전-특별전
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한빛사 자연생태 사진공모전
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장려상  코끼리를 삼킨 보아뱀
등록자 Re:Plus
사용한 세포 및 조직 Neuron (green), Microglia (red) / Mouse hippocampus
촬영일자 2015년 1월 20일
촬영장비명 Zeiss Axio Scope with EC PLAN NEOFLUAR (형광현미경)
형광제품명 goat anti-mouse Iba-1 polyclonal antibodies, rat anti-rabbit NeuN monoclonal antibodies (Abcam), anti-goat Alexa 546 and anti-rabbit Alexa 488 (Life technologies), ProLong Gold antifade reagent with DAPI (Life technologies)
실험(촬영)방법 Mice were cardiac perfused with 4% paraformaldehyde (PFA) (Dea Jung Chemicals) in PBS and the brain was harvested and made frozen sections, followed by fixation using 100% methanol for 10 min at the room temperature. The sections were incubated with 0.5% Triton X-100 in PBS for 5 min, followed by incubation with Iba-1 (goat anti-mouse Iba-1 polyclonal antibodies, Abcam) and NeuN primary antibodies (rat anti-rabbit NeuN monoclonal antibodies, Abcam) for overnight at 4 °C. Secondary antibodies were anti-goat Alexa 546 (Life technologies) and anti-rabbit Alexa 488 (Life technologies), respectively, and incubated for 1 hr at room temperature. The sections were finally mounted with ProLong Gold antifade reagent with DAPI (Life technologies), and examined with a Zeiss Axio Scope with EC PLAN NEOFLUAR at 10× objective lenses. Digital images were taken using AxioCam HRM camera and processed with AxioVision 4.8 software.
학술적가치/특징/장점 Mouse brain의 neuron과 brain에 존재하는 immune cell인 microglia의 interaction을 볼 수 있음. 정상 뇌조직에서 microglia는 neuron과 interaction하여 brain homeostasis를 담당하고있다고 알려져있음. 본 연구자는 형광면역염색을 통해 neuron주변에 굉장히 많은 수의 microglia가 존재하고 있으며 이들은 physically interact하고 있다는 사실을 확인함. 또한 휴지기 상태 (resting state)와 활성화 상태 (activated state)에서 cellular morphology를 다르게 가진다고 알려져 있는 microglia를 염색해냄으로써 정상 뇌조직에서의 휴지기 상태 인 ramified morphology의 microglia를 볼 수 있었음.
목록 등록 2015-08-27 16:50  |  조회 2,115   트위터페이스북 CC BY-SA
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