[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 한국을 빛내는 사람들
웹진발간
스폰서배너광고 안내  배너1
전체보기 한빛사논문 추천논문 인터뷰 그이후 한빛사통계
오지환
오지환 (Jee-Hwan Oh) 저자 이메일 보기
University of Wisconsin-Madison
 
조회 50  인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
CRISPR–Cas9-assisted recombineering in Lactobacillus reuteri
열기 Authors and Affiliations

Abstract

Clustered regularly interspaced palindromic repeats (CRISPRs) and the CRISPR-associated (Cas) nuclease protect bacteria and archeae from foreign DNA by site-specific cleavage of incoming DNA. Type-II CRISPR-Cas systems, such as the Streptococcus pyogenes CRISPR-Cas9 system, can be adapted such that Cas9 can be guided to a user-defined site in the chromosome to introduce double-stranded breaks. Here we have developed and optimized CRISPR-Cas9 function in the lactic acid bacterium Lactobacillus reuteri ATCC PTA 6475. We established proof-of-concept showing that CRISPR-Cas9 selection combined with single-stranded DNA (ssDNA) recombineering is a realistic approach to identify at high efficiencies edited cells in a lactic acid bacterium. We show for three independent targets that subtle changes in the bacterial genome can be recovered at efficiencies ranging from 90 to 100%. By combining CRISPR-Cas9 and recombineering, we successfully applied codon saturation mutagenesis in the L. reuteri chromosome. Also, CRISPR-Cas9 selection is critical to identify low-efficiency events such as oligonucleotide-mediated chromosome deletions. This also means that CRISPR-Cas9 selection will allow identification of recombinant cells in bacteria with low recombineering efficiencies, eliminating the need for ssDNA recombineering optimization procedures. We envision that CRISPR-Cas genome editing has the potential to change the landscape of genome editing in lactic acid bacteria, and other Gram-positive bacteria.

논문정보
- 형식: Research article
- 게재일: 2014년 09월 (BRIC 등록일 2019-02-01)
- 연구진: 국외연구진
- 분야: Genetics
- 피인용횟수: 120회 이상 인용된 논문
RNF20/40 의존적 eEF1BδL 모노유비퀴틴화에 의한 열충격 유전자 전사 조절[Nucleic Acids Res.]
인선아
발표: 인선아 (KAIST)
일자: 2019년 2월 22일 (금) 오후 02시 (한국시간)
언어: 한국어
참석자 접수신청하기

  댓글 0
등록
 
목록
라이카코리아
관련링크
오지환 님 전체논문보기 >
관련분야 논문보기
Genetics

외부링크
Google (by Jee-Hwan Oh)
Pubmed (by Jee-Hwan Oh)
프리미엄 Bio일정 Bio일정 프리미엄 안내
2019 Korean Researchers’ Night in AACR 참가 신청 안내 (미국 애틀랜타)
2019 Korean Researchers’ Night in AACR 참가 신청 안내 (미국 애틀랜타)
사전접수: ~2019.02.20
날짜: 2019.03.31
장소: Atlanta Marriott Marquis
[BRIC Webinar]RNF20/40 의존적 eEF1BδL 모노유비퀴틴화에 의한 열충격 유전자 전사 조절-인선아 (KAIST)
대한골대사학회 The 7th Seoul Symposium on Bone Health & 제31차 춘계학술대회
대한골대사학회 The 7th Seoul Symposium on Bone Health & 제31차 춘계학술대회
초록접수: ~2019.02.28
사전접수: ~2019.04.01
날짜: 2019.05.30~06.01
장소: 서울드래곤시티 5층 백두룸
2019 서경배과학재단 신진과학자 연구지원 프로그램 공고
위로가기
한빛사 홈  |  한빛사FAQ  |  한빛사 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북    RSS서비스 RSS
1550318161 0.19512000
1550318161 0.58300900
0.38788890838623 초 소요